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囊虫病胶乳凝集试验

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1 概述

猪带绦虫幼虫-猪囊尾蚴寄生人体可引起猪囊虫病,俗称囊虫病。猪带绦虫的成虫亦可寄生于人体小肠引起猪带绦虫病,俗称绦虫病。人体感染囊虫病的方式主要有3种:①异体感染:食入猪带绦虫虫卵污染的食物或水;②自身体外感染:绦虫病患者误食自身体内排出的虫卵或节片;③自身体内感染:绦虫病患者肠内成虫脱落的孕节片,因胃肠道蠕动(如恶心呕吐)进入胃内,节片被消化释出虫卵而感染。囊虫病的临床表现因囊虫的寄生部位和数量多少而不同,当囊虫寄生在皮下、肌肉时,症状轻微或无症状,但如寄生在脏器,特别在脑、眼或中神经系统,则可产生严重的临床症状和后果。因囊虫寄生于组织器官内,难以取材作病原学诊断,多应用免疫学方法进行诊断。

目前,用于诊断的抗原主要为囊液粗制抗原和纯化抗原。检测方法主要有IDT、IHA、IFAT、ELISA、ELIB等。

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2 囊虫病胶乳凝集试验的别名

猪囊尾蚴病乳胶凝集试验

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3 检查名称

囊虫病胶乳凝集试验

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4 分类

血清学检查 > 其他

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5 囊虫病胶乳凝集试验的原理

是以聚苯乙烯胶乳微粒为载体的间接凝集试验。即用抗原或抗体致敏胶乳,再以此致敏胶乳检测相应的抗体或抗原。

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6 试剂

(1)致敏胶乳试剂的制备:物理吸附用的胶乳多为聚苯乙烯,化学交联用的胶乳为羧化聚苯乙烯。聚苯乙烯胶乳是苯乙烯单体在引发剂过硫酸钾作用下聚合而成的。胶乳颗粒的大小,随聚合中各物质的比例量不同而异,可根据不同用途进行合成的。国内较多采用颗粒为0.5~0.6μm的胶乳。胶乳致敏常用如下方法。

①物理吸附法:

A.先用蒸馏水将10%胶乳悬液稀释至1%~2%,将吸附物(抗原或抗体)溶于pH8.2硼酸缓冲盐水或pH8.2甘氨酸缓冲盐水中。逐滴加入稀释胶乳中,充分混匀。1%胶乳悬液1ml,一般能吸附0.1~1mg物质。

B.放室温,37℃或50~56℃30~60min。某些物质吸附要数天才能达到平衡

C.吸附完后,以4000r/min、30~45min除去游离的未吸附物,沉淀用同一缓冲液恢复悬液状态。

②化学交联法:

A.为了提高敏感度,先将ε-氨基已酸与羧化聚苯乙烯缩合,以增大配基与载体表面的距离。

B.再用化学交联法与抗原或抗体结合。此法制成的化学交联型HCG胶乳用于妊娠诊断,敏感度和特异性均高于物理吸附的HCG胶乳,试剂的稳定性也显著提高。

乳上羧基和被交联物上的氨基是通过缩合剂碳化二亚胺来完成的。交联缓冲液常用0.1mol/LpH7.2~7.6PBS。

(2)受检标本

(3)特制反应板:在玻璃板正面以红漆拌石膏粉制成2.5cm×2.5cm方格若干,背面黑漆。

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7 操作方法

(1)胶乳凝集试验:在反应板的一格内,先加受检标本1滴,再加致敏乳胶1滴,连续摇动2~3min观察结果。胶乳凝集者为阳性,不凝集者为阴性。同时作阴、阳性对照。

链球菌溶血素“O”测定胶乳凝集试验。

(2)胶乳凝集抑制试验:先加受检标本1滴,再加1滴配对抗血清混匀,再加1滴致敏胶乳抗原,连续摇动2~3min观察结果。胶乳凝集者为阴性,不凝集者为阳性。同时作对照。

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8 正常值

阴性。

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9 化验结果临床意义

检测抗体阳性率为81.4%;McAb-LAT检测囊虫病人CAg阳性率为73.05%,经有效治疗后3个月阳性率为44.11%。检测脑囊虫病人:活动期为97.29%,钙化期为31.11%;脑脊液的检出率高于血清。

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10 附注

(1)囊虫胶乳凝集试验法,操作简便、快速,但敏感性略低。

(2)受检标本和试剂的加入顺序应遵照规定的步骤,否则无法判定结果。

(3)试剂一般保存在4~10℃较为适宜,用前取出待接近室温时的温度再使用。

(4)本试验一般作定性测定,严格地操作也能达到半定量的要求。液滴大小均匀一致,每滴约50μl。

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11 相关疾病

囊虫病、猪带绦虫病

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