医学百科

锡克试验毒素

目录

1 拼音

xī kè shì yàn dú sù

2 英文参考

Schick Test Toxin[2010年版药典]

展开本节剩余内容

3 锡克试验毒素药典标准

3.1 品名

3.1.1 中文名

锡克试验毒素

3.1.2 汉语拼音

Xike Shiyan Dusu

3.1.3 英文名

Schick Test Toxin

3.2 定义、组成及用途

品系用纯化白喉毒素经稀释制成,用于测定人体对白喉的敏感性。

3.3 1 基本要求

生产和检定用设施、原材料辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

3.4 制造

3.4.1 2.1 菌种生产用菌种

应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定

3.4.1.1 2.1.1  名称及来源

采用白喉杆菌PW8株(CMCC 38007)或由PW8株筛选的产毒高、免疫力强的菌种,或其他经批准的菌种。

3.4.1.2 2.1.2  种子批的建立

应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。

3.4.1.3 2.1.3  种子批的传代

主种子批自启开后传代应不超过5代。

3.4.1.4 2.1.4  种子批的检定
3.4.1.4.1 2.1.4.1  培养特性

在吕氏琼脂培养基生长菌落应星灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐;在亚碲酸钾琼脂培养基上生长的菌落应星灰黑色、具金属光泽;在血琼脂培养基上生长的菌落应呈灰白色、不透明、不产生α溶血素。

3.4.1.4.2 2.1.4.2  染色镜检

革兰氏染色阳性,具异染颗粒;菌体呈一端或两端膨大、杆状,菌体排列呈栅栏状、X状或Y状。

3.4.1.4.3 2.1.4.3  生化反应

发酵葡萄糖麦芽糖半乳糖,均产酸不产气;不发酵蔗糖甘露醇乳糖2010年版药典三部附录XIV)。

3.4.1.4.4 2.1.4.4  特异性中和反应

接种于Elek's琼脂培养基上,可见明显白色沉淀线。

3.4.1.5 2.1.5  种子批的保存

种子批应冻干保存于8℃以下。

3.4.2 2.2 原液

3.4.2.1 2.2.1  生产用种子

工作种子批检定合格后方可用于生产。由工作种子批传代至适宜的培养基,然后传代至产毒培养基种子管2~3代,再传代至产毒培养基培养制成。

3.4.2.2 2.2.2  培养基

采用胰酶牛肉消化液培养基或经批准的其他适宜培养基,但不得采用含马肉或其他马体组织的培养基。

3.4.2.3 2.2.3  接种和培养

将生产用种子接种于产毒培养基,经适宜温度、时间培养后,澄清、除菌,即得毒素,其效价应不低于150Lf/ml。制备过程应避免杂菌污染,经镜检发现已污染者应废弃。

3.4.2.4 2.2.4  精制

2.2.4.1  毒素可采用硫酸盐析活性炭吸附法或经批准的其他方法纯化。用于纯化的毒素可多批混合,但不得超过5批。

2.2.4.2  毒素纯化后应经除菌过滤。用同一菌种、培养基处方和纯化方法制造的毒素,在同一容器内混合均匀后除菌过滤,即为一批原液。原液应经2~8℃保存适当时间,使其毒力稳定后,方可用于半成品配制。

3.4.2.5 2.2.5  原液检定

按3.1项进行。

3.4.3 2.3 半成品

3.4.3.1 2.3.1  配制

将原液测毒后稀释至0.2MLD/ml。稀释液可采用甘油明胶硼酸缓冲液,或经批准的其他无致敏性的适宜缓冲液。

3.4.3.2 2.3.2  半成品检定

按3.2项进行。

3.4.4 2.4 成品

3.4.4.1 2.4.1  分批

应符合“生物制品分批规程”规定。

3.4.4.2 2.4.2  分装

应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。

3.4.4.3 2.4.3  规格

每瓶1ml,含白喉毒素0.2MLD。

3.4.4.4 2.4.4  包装

应符合“生物制品包装规程”规定。

3.5 3 检定

3.5.1 3.1 原液检定

3.5.1.1 3.1.1  纯度

每1mg蛋白氮应不低于2000Lf(2010年版药典三部附录Ⅺ D)。

3.5.1.2 3.1.2  毒力测定

应为25~50MLD/Lf。

3.5.2 3.2 半成品检定

3.5.2.1 3.2.1  外观检查

应为无色或淡乳白色澄明液体,无沉淀或其他异物。

3.5.2.2 3.2.2  pH值

应为7.2~8.2(2010年版药典三部附录Ⅴ A)。

3.5.2.3 3.2.3  效力测定
3.5.2.3.1 3.2.3.1  MLD测定

选用体重为240~270g的豚鼠4只,每只于腹部皮下注射本品5ml,至少应有3只在注射后72~96小时死亡,另1只可在72小时前或96小时后死亡。即本品含纯化白喉毒素约0.2MLD/ml。

3.5.2.3.2 3.2.3.2  结合力测定

白喉抗毒素标准品稀释至1/75IU/ml及1/125IU/ml,加等量本品,置室温或37℃中和30分钟后,皮内注射2只体重为2~3kg的家兔各0.2ml,72小时判定结果。注射含1/1250IU白喉抗毒素中和液的部位应星10mm×10mm或稍强的红肿反应,含1/750IU白喉抗毒素中和液的注射部位应无反应。

3.5.2.4 3.2.4  稳定性试验

本品于37℃放置24小时,其效力应符合3.2.3项规定。

3.5.2.5 3.2.5  无菌检查

依法检查(2010年版药典三部附录Ⅻ A),应符合规定。

3.5.3 3.3 成品检定

3.5.3.1 3.3.1  鉴别试验

按3.2.3.2进行,应符合规定。

3.5.3.2 3.3.2  物理检查
3.5.3.2.1 3.3.2.1  外观

应为无色或淡乳白色澄明液体,无沉淀或其他异物。

3.5.3.2.2 3.3.2.2  装量

依法检查(2010年版药典三部附录Ⅰ A),应不低于标示量。

3.5.3.3 3.3.3  化学检定
3.5.3.3.1 pH值

应为7.2~8.2(2010年版药典三部附录Ⅴ A)。

3.5.3.4 3.3.4  效力测定

按3.2.3项进行,应符合规定。

3.5.3.5 3.3.5  无菌检查

依法检查(2010年版药典三部附录Ⅻ A),应符合规定。

3.6 4 保存、运输及有效期

于2~8℃避光保存和运输。自生产之日起,有效期为24个月。

3.7 使用说明

应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。

Ⅳ  体外诊断

3.8 版本

中华人民共和国药典》2010年版

展开本节剩余内容

4 锡克试验毒素制造及检定规程

[1]本品含精制白喉毒素约0.2MLD/ml。用于测定人体对白喉的敏感性。

4.1 制造

1.1 所用精制白喉毒素纯度应为2000Lf/mgPN以上,毒力应为25~50MLD/Lf。

1.2 毒素稀释液宜用甘油明胶硼酸盐缓冲液,或其他无抗原性和致敏性的适宜缓冲液。

4.2 半成品检定

2.1 物理性

本品应为无色或淡乳白色澄明液体,无沉淀或其他异物。

2.2 本品的pH值应为7.2~8.2。

2.3 无菌试验

按《生物制品无菌试验规程》进行。

2.4 效力试验

2.4.1 MLD试验

用体重240~270g豚鼠4只,各皮下注射待检锡克试验毒素5ml,至少应有3只在注射后72~96小时死亡,另1只可早死或晚死。即本品应含精制白喉毒素约0.2MLD/ml。

2.4.2 结合力测定

将标准抗毒素稀释至1/75IU/ml及1/125IU/ml,加等量待检锡克试验毒素,室温或37℃中和30分钟。分别注射2只体重2~3kg家兔皮内各0.2ml,72小时判定结果。含1/1250IU抗毒素的注射部位应呈10×10mm或稍强的红肿反应,含1/750IU/ml抗毒素中和液的注射部位应无反应。

2.4.3 效力稳定性试验

本品放置37℃24小时,其效力应符合2.4.1及2.4.2项的要求。

4.3 分装

将锡克试验毒素降温至15℃以下进行分装。封口应十分小心、快速,避免温度过高影响制品效价。

4.4 成品检定

4.1 物理性状

本品应为无色或淡乳白色澄明液体,无沉淀或其他异物。

4.2 pH值

pH值应为7.2~8.2。

4.3 无菌试验

按《生物制品无菌试验规程》进行。

4.4 效力试验

按2.4项进行。

4.5 保存与效期

必须保存于2~8℃。自效力试验合格之日起效期为1年。

展开本节剩余内容

5 锡克试验毒素使用说明书

本品系用精制白喉毒素稀释而成。供测定人体对白喉敏感性之用。

本品为无色或淡乳白色澄明液体,无沉淀或其他异物。

5.1 用法

前臂掌侧下1/3处皮内注射0.1ml,注射部位应有小皮丘隆起。

5.2 结果判定

注射后72小时判定反应。注射部位呈10×10mm或以上的红肿反应判为阳性。10×10mm以下或无反应者判定为阴性

阳性反应一般表示对白喉无免疫力。阳性反应一般表示对白喉有免疫力。

5.3 注意事项

如制品出现混浊、沉淀、异物,曾经冻结,标签不清及过期失效,均不可使用。

5.4 保存

必须保存于2~8℃暗处,不得冻结。

展开本节剩余内容

6 参考资料

  1. ^ [1] . "《中国生物制品规程》".
展开本节剩余内容
显示剩余内容

分享到

编辑

词条锡克试验毒素abababwanyan合作编辑创建

分类

相关条目

医学百科App-更靠谱的医学知识!

词典 百科 测评 计算器