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外周血造血干细胞单采

外周血造血干细胞单采

外周血造血干细胞(PBSC)是存在于外周循环血液中的一种具有自我更新、分裂增殖和分化功能细胞,正常成人PBSC占外周血液单个核细胞的1‰左右,经适当动员处理可提高至10‰。PBSC的比重在1.058~1.060,直径为6~7μm。

1 外周血造血干细胞分类

1.自身PBSC  即取自患者自身,单采保存待自身PBSC移植时使用。

2.同种异体  取自正常成人或与患者有血缘关系的健康亲属。单采后可用于同种异体PBSC移植。

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2 外周血造血干细胞的动员

2.1 动员方法分类

(1)化学药物动员:造血干细胞动员剂应具备以下几个条件:①动员效果好,提高外周血中造血干细胞倍数高,动员的造血干细胞有重建造血功能;②不良反应小;③动员作用应持续时间长,便于用血细胞分离器分离外周血造血干细胞。

造血干细胞动员剂一般分为3种类型:①肿瘤化疗药物,如环磷酰胺马利兰柔红霉素阿糖胞苷等。这些药物只适用于恶性病人。②正常人和病人都可采用的药物,如硫酸葡聚糖等聚阴离子制剂属于这种造血干细胞动员剂,其效果好,动员作用持续时间长。③各种重组的人造血细胞刺激因子(重组细胞集落刺激因子),如G-CSF、M-CSF、GM-CSF、IL-3、IL-6和SCF等,其不良反应小,动员效果好。

(2)辐射动员。放射线既能直接杀灭肿瘤细胞,同时也使正常造血细胞受到伤害,引起反馈性的造血增生,外周血中造血干细胞数量随着增加。这种动员方法适用于血液病、某些恶性肿瘤转移患者。

2.2 动员方法

(1)正常人的动员:

①这类人员主要有作为同种异体PBSC移植的供体,或作为以后有可能需要进行自体PBSC移植的正常人,如从事辐射工作人员、宗教信仰(拒绝异体外周血造血干细胞移埴)。这类人员以用药物动员为佳,动员剂主要为重组细胞集落刺激因子。

②方法:于PBSC单采前5d,皮下注射重组细胞集落刺激因子,如G-CSF 2.5~5.0μg/(kg·d),1/d,采集当天皮下注射较高剂量重组细胞集落刺激因子(如G-CSF 5μg/kg),并静脉推注地塞米松10mg。一般情况下,单采前(使用地塞米松前)须计数外周血中白细胞总数及分类,若白细胞总数未达到20×109/L,则应延长动员时间,并适当增加动员剂的剂量,直至白细胞总数达20×109/L。第1次单采后计数单个核细胞数及测定CD+34细胞百分率计算是否达到移植剂量,若低于移植剂量,须进行第2、第3次单采,此时亦要继续使用动员剂,总采集数必须超过移植剂量,若能达到2倍移植剂量更佳。

(2)患者的动员:①对象:拟行自身PB-SC移植的患者。②方法:动员的方案有:化疗药物+重组细胞集落刺激因子、全身照射+重组细胞集落刺激因子和化疗药物+全身照射+重组细胞集落刺激因子。患者动员4d后监测白细胞数,若白细胞计数达1×109/L和血小板达20×109/L后,开始单采外周血造血干细胞,单采当天仍需使用重组细胞集落刺激因子和静脉推注地塞米松10mg。一般需单采5-7次,每次均须计数单个核细胞总数和测定CD+34细胞百分率,当达到移植剂量时停止单采。

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3 单采操作

1.前提  经过PBSC的动员,供体或患者的白细胞总数和血小板计数达到要求后,可在静脉推注地塞米松10mg后1~2h开始单采。

2.单采器材准备  同血小板单采

3.单采操作 (1)同血小板单采。 (2)全血处理量一般为8-15L。

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4 注意事项

1.单采过程中严密监测献血员/患者生命体征。

2.单采过程中严密注意献血员/患者对抗凝剂反应,若出现异常反应,应迅速处理。

3.严格无菌操作,预防感染及单采成分被污染

4.单采前应向献血员/患者或家属说明单采的目的、过程及可能出现的不良反应及意外,并要求其签字。

5.每次单采应有详细的记录,并注意保存。

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