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升压物质检查法

1 拼音

shēng yā wù zhì jiǎn chá fǎ

本法系比较垂体后叶标准品(S)与供试品(T)升高大鼠血压的程度,以判定供试品中所含升压物质的限度是否符合规定

1.1 标准品溶液的配制

缩宫素生物检定法标准品溶液的配制法,按垂体后叶标准品升压素单位计算,配成每1ml中含1单位的溶液,分装于适宜的容器内,4~8℃贮存,如无沉淀析出,可在3个月内使用。

1.2 标准品稀释液的配制

临用前,精密吸取标准品溶液适量,用氯化钠注射液配成每1ml中含0.1单位的稀释液。

1.3 供试品溶液的配制

按正文规定的限量,配成适当浓度的供试品溶液;试验时,供试品溶液与标准品稀释液的注入体积应相等。

1.4 检查

取健康无伤、体重300g以上的成年雄性大鼠,用适宜的麻醉剂(如腹腔注射乌拉坦1g/kg)麻醉后,固定于保温手术台上,分离气管,必要时插入插管,以使呼吸通畅。在一侧颈静脉或股静脉插入静脉插管,供注射药液用,按体重每100g注入肝素溶液50~100单位,然后剥离另一侧颈动脉,插入与测压计相连的动脉插管,在插管与测压计通路中充满含适量肝素钠的氯化钠注射液。全部手术完毕后,将测压计的读数调节到与动物血压相当的高度,开启动脉夹,记录血压。缓缓注入适宜的交感神经阻断药(如甲磺酸酚妥拉明,按大鼠每100g体重注入0.1mg,隔5~10分钟用相同剂量再注射一次),待血压稳定后,即可进行药液注射。各次注射速度应基本相同,并于注射后立即注入氯化钠注射液0.5ml,相邻两次注射的间隔时间应基本相同(一般约为5~10分钟),每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行。

选定高低两剂量的垂体后叶标准品稀释液(ml),高低剂量之比约为1∶0.6,低剂量应能使大鼠血压升高1.33~3.55kPa,将高低剂量轮流重复注入2~3次,如高剂量所致反应的平均值大于低剂量所致反应的平均值,可认为该动物的灵敏度符合规定。

在上述高低剂量范围内选定标准品稀释液的剂量(ds),供试品溶液按正文中规定的剂量(dT),照下列次序注射一组4个剂量:ds、dT、dT、dS,然后以第一与第叁、第二与第四剂量所致的反应分别比较;如dT所致的反应值均不大于ds所致反应值的一半,即认为供试品的升压物质检查符合规定。否则应按上述次序继续注射一组4个剂量,并按相同方法分别比较两组内各对ds、dT所致的反应值;如dT所致的反应值均不大于ds所致的反应值,仍认为供试品的升压物质检查符合规定,如dT所致的反应值均大于ds所致的反应值,即认为供试品的升压物质检查不符合规定;否则应另取动物复试。如复试的结果仍有dT所致的反应值大于ds所致的反应值,即认为供试品的升压物质检查不符合规定.

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