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凝血因子活性测定(因子Ⅷ∶C、Ⅸ∶C)

1 拼音

níng xuè yīn zǐ huó xìng cè dìng (yīn zǐ Ⅷ∶C、Ⅸ∶C)

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2 概述

凝血因子Ⅶ是一个大分子复合物,由血管性血友病因子(VWF)和因子Ⅷ凝血活性(Ⅷ∶C)两部分组成。因子Ⅷ∶C作为因子Ⅸa的辅因子,与Ca2磷脂表面共同形成复合物(Ⅸa、Ⅷa、Ca2、磷脂),该复合物激活因子Ⅹ。测定因子Ⅶ和Ⅸ凝血活性的方法有一期法和二期法两种,本节仅介绍一期法。

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3 检查名称

凝血因子活性测定(因子Ⅷ∶C、Ⅸ∶C)

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4 分类

临床血液检查 > 出血和凝血检查

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5 取材

血液

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6 凝血因子活性测定(因子Ⅷ∶C、Ⅸ∶C)的原理

稀释的正常或被检血浆与缺乏因子Ⅷ或Ⅸ基质血浆混合,作白陶土部分凝血活酶复钙时间。将病人血浆的测定结果与正常血浆作比较,计算病人血浆所含因子Ⅷ∶C或因子Ⅸ∶C相对于健康人的百分率。

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7 试剂

(1)缺乏因子Ⅷ或因子Ⅸ的基质血浆(Ⅶ∶C或Ⅸ∶C小于1%);可用先天性或人工制备的缺乏因子Ⅷ或Ⅸ的血浆,分装,保存-40~-20℃备用,可保存2~4个月。

(2)脑磷脂溶液,用兔脑或人脑制作脑磷脂悬液,临用时用生理盐水作1∶100稀释,必要时可调整稀释度。

(3)5g/L白陶土生理盐水悬液。

(4)0.025mol/L氯化钙溶液。

(5)咪唑缓冲液:①甲液:咪唑1.36g,氯化钠2.34g溶于水200ml中,再加0.1mol/L)盐酸74.4ml,最后加水至400ml;②乙液:0.13mol/L枸橼酸溶液;③工作液:5份甲液加1份乙液混合而成。

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8 操作方法

(1)标准曲线制备:健康人新鲜混合血浆,以咪唑工作液作1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、……稀释。将各稀释度的样品分别与缺乏因子Ⅷ∶C或Ⅸ∶C的基质血浆、脑磷脂悬液及5g/L白陶土生理盐水悬液各0.1ml,混匀置37℃预温2min整,加0.05mol/L氯化钙溶液0.1ml,记录凝固时间。以凝固时间的对数和浓度(1∶10作为100%)的对数作直线回归处理,或以稀释度为横坐标,凝固时间为纵坐标,在双对数坐标纸上绘制曲线。

(2)空白测定管:取基质血浆、咪唑工作液、脑磷脂悬液及5g/L白陶土生理盐水悬液各0.1ml,混匀,测定方法同上。要求空白管测定时间在240~250s左右。凝固时间的长短可用脑磷脂液的浓度来调节。

(3)受检标本测定:取置于冰浴中的受检者枸橼酸盐抗凝血浆,以咪唑工作液作1∶20稀释,测定方法同上。然后将其凝固时间代入双对数计算回归方程或查标准曲线,得出因子Ⅶ∶C或Ⅸ∶C再乘以2。若凝固时间过长,应减少稀释倍数,以使凝固时间处于线性的范围内。

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9 正常值

因子Ⅷ∶C 78%~128%;因子Ⅸ∶C 68%~128%。

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10 化验结果临床意义

(1)因子Ⅷ∶C或Ⅸ∶C水平增高:见于高凝状态和血栓性疾病。尤其是静脉血栓形形形成,如深静脉血栓形形形成、肺栓塞肾病综合征、口服避孕药妊娠高血压综合征恶性肿瘤以及肝功能衰竭时因子Ⅷ∶C水平增高。

(2)因子Ⅷ∶C或Ⅸ∶C水平降低:见于血友病甲或血友病乙,按其降低程度分为:重型Ⅶ∶C或Ⅸ∶C小于2%,中型2%~5%,轻型5%~25%,亚临床型25%~45%。因子Ⅷ∶C降低还见于血管性血友病、DIC和抗因子Ⅷ∶C抗体所致的获得性血发病甲;因子Ⅸ∶C降低还见于肝脏疾病、维生素K缺乏缺乏症、DIC和口服抗凝剂等。

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11 附注

(1)缺乏因子Ⅷ或Ⅸ的基质血浆的因子水平必须小于1%,而其他凝血因子又必须正常,置-80~-40℃冰箱中保存。

(2)受检标本应立即测定或分离血浆置-40~-20℃冰箱中2~3个月内待测,避免反复冻融。

(3)每次测定都应作标准曲线。正常标准血浆要求至少30人以上的混合血浆,分装、冻干,-40~-20℃保存2~3个月。

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12 相关疾病

静脉血栓形成血栓形成、肺栓塞、肾病综合征、妊娠高血压综合征、血友病甲、血友病乙

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