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白细胞游走抑制试验

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1 概述

细胞免疫功能在机体防御、自身稳定免疫调节中起重要的作用,是机体免疫的一个重要的组成部分。细胞免疫检验,主要检测细胞表面受体及其产生的淋巴因子,反映免疫活性细胞的数量与功能来判定机体的细胞免疫功能状况,从而阐明某些疾病的发病机制,为临床提供诊断治疗的依据。目前的检测项目有T细胞(T细胞亚群)、K细胞、NK细胞B细胞的数量和T淋巴细胞花环试验、淋巴细胞转化试验和淋巴因子测定等。

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2 白细胞游走抑制试验的别名

白细胞移动抑制试验;LIT

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3 检查名称

白细胞游走抑制试验

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4 分类

免疫学检查 > 细胞免疫测定

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5 化验取材

血液

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6 白细胞游走抑制试验的原理

致敏淋巴细胞在体外与相应抗原作用后能产生抑制多核白细胞移动的因子(leucocyte migration inhibitory factor,LIF),可以抑制白细胞移动。人体淋巴细胞产生的LIF也无种属特异性,故可用人体白细胞或豚鼠白细胞作为指示细胞进行LIF的检测。

LIF的检测分为直接法和间接法两种,一般认为前者比后者敏感。直接法是将分离待测的受检者白细胞与已知抗原在37℃温育后,测定白细胞移动情况。间接法是将待测白细胞先与已知抗原在37℃温育后,再取培养上清液与正常人白细胞或豚鼠白细胞作用,测定白细胞移动情况。两种方法都是根据指示细胞移动受抑制的程度判断机体有无相应的细胞免疫功能。

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7 试剂

同直接法和间接法。

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8 操作方法

(1)取肝素凝血3~5ml,用分层液分离白细胞,用Hank液洗两次,计数后用细胞培养液配成8×107细胞/ml。

(2)将白细胞悬液分装于毛细管中,方法同前。每3ml血可分装8~10只毛细管。装入各毛细管中的淋巴细胞液要求相等。用火焰将毛细管一端封闭,置水平离心机内离心1000r/min,10min。离心后细胞被压紧呈4~6mm高,表层发自主要是白细胞,下层发红为红白细胞混杂。在细胞与液体交界处锯断毛细管用少量凡士林将封闭端黏在培养小室底层,每个小室可放1~2只毛细管。

(3)每3~4只毛细管分为一组,其中一组小室中加满培养液,另一组或几组小室中加满含有一定浓度抗原的培养液(注意勿使毛细管和培养小室中留有气泡)。小室用盖玻片封闭,置水平位于37℃孵育24h,同上法测量毛细管中白细胞移动面积,试验结果用移动指数(MI)表示。

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9 正常值

移动指数1.0±0.3。

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10 化验结果临床意义

反映器官组织移植排异反应。移动指数在正常范围,表示受体处于稳定期。>1.20时表示受体对移植器官或组织抗原处于敏感状态。

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11 附注

(1)为防止污染影响结果,所有器材均要求无菌,操作过程要求在无菌条件下进行。

(2)毛细管内径要求一致。

(3)在毛细管中灌注细胞时,细胞液要充分混匀,以免因各管浓度差异影响结果。

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