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5'-核苷酸酶

1 拼音

5'-hé gān suān méi

2 英文参考

5’-nucleotidase

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3 概述

5'-核苷酸酶(5'-NT)是一种对底物特异性不高的水解酶,可作用于多种核苷酸。此酶广泛存在于人体组织,如肝、胆、肠、脑、心、胰等。定位于细胞质膜上,在肝内此酶主要存在于胆小管和窦状隙膜内。5'-NT测定主要是比色法,操作麻烦,难以自动化,但试剂易得,适用于基层单位应用。

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4 5'-核苷酸酶的别名

5'-NT

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5 5'-核苷酸酶的医学检查

5.1 检查名称

5'-核苷酸酶

5.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

5.3 5'-核苷酸酶的测定原理

5'-核苷酸酶比色法:5'-NT作用于5'-磷酸腺嘌呤单核苷酸(5'-AMP),生成腺嘌呤核苷磷酸,利用测无机磷的方法使其显色,颜色深浅与5'-NT活性呈正相关

5.4 试剂

(1)0.04mol/L巴比妥缓冲液(pH 7.5):称取巴比妥钠8.25g,溶于0.2mol/L HCl 140ml,调pH至7.5(37℃),加蒸馏水稀释至1000ml。

(2)10mmol/L AMP基质液:精称5'-AMP 347mg,加0.1mol/L NaOH 18ml,加蒸馏水至100ml,置冰箱保存

(3)0.1mol/L氯化溶液:称取氯化镍(NiCl·6H2O)4.75g,用蒸馏水溶解并稀释至200ml。

(4)0.02mol/L硫酸锰溶液:称取MnSO4·H2O 338mg,用蒸馏水溶解并稀释至100ml。

(5)100g/L三氯醋酸

(6)2.4mol/L醋酸盐缓冲液(pH4.0):称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)2.5g,醋酸钠(CH3COONa·3H2O)46g,加2mol/L醋酸(冰醋酸115ml,以蒸馏水稀释至1L)至1000ml,用结晶醋酸钠或冰醋酸调pH至4.0。

(7)50g/L钼酸铵溶液:称取5g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]溶于蒸馏水并稀释至100ml。

(8)还原剂:称米吐尔(硫酸对甲基氨基AR)2g,溶于80ml蒸馏水中,加亚硫酸钠(Na2SO3·7H2O)10g(或无水亚硫酸钠5g),加蒸馏水至100ml,过滤后置棕色瓶内冰箱保存,如变为棕色且有沉淀,则还原性降低,应重配。

(9)磷标准贮存液(6mmol/L):精称KH2PO4 0.408g,用蒸馏水溶解并稀释至500ml,加氯仿数滴防腐

(10)磷标准应用液(0.06mmol/L):取磷标准贮存液1ml,加100g/L三氯醋酸溶溶液至100ml,4℃冰箱可稳定4周。

5.5 操作方法

按表1操作。

混合后5min,用680nm波长比色,以蒸馏水调零,读取各管吸光度。

5.6 正常值

2~17U/L。

5.7 化验结果临床意义

5'-NT测定主要用于肝胆系统疾病的诊断和骨骼疾病的鉴别诊断。血清5'-NT活性升高主要见于肝胆系统疾病,如阻塞性黄疸肝癌肝炎等,其活性变化与ALP一致。但骨骼系统疾病,如肿瘤转移畸形性骨炎佝偻病甲状旁腺功能亢进等,通常ALP活性升高,而5'-NT正常。因此ALP和5'-NT同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。

5.8 附注

(1)用血浆测定可引起混浊,与金属离子螯合的抗凝剂干扰镁的激活作用。

(2)米吐尔也可以用1-氨基-2-萘酚-4-磺酸代替。

(3)本法酶促反应也可用30min,其计算结果时的系数应改为20。

5.9 相关疾病

黄疸、畸形性骨炎

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